取10cm左右深层土壤10g备用制备土壤稀释液:称取土壤1g,放入有99mL无菌水的三角瓶中,振荡均匀,即为稀释10-2的土壤悬液然后进行十倍梯度稀释,依次制备稀释度的土壤稀释液;按培养基配方各配置牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、马丁氏培养基、高氏Ⅰ号培养基各100ml。*后分别倒3个平板.;用无菌吸管吸取0.1ml相应浓度土壤稀释液,以无菌操作技术接种在平板上,涂布均匀。*选用三个稀释度接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,放线菌与霉菌选用三个稀释度,分别接种于高氏Ⅰ号培养基、马丁氏培养基;*平板于37℃恒温培养1~2d,放线菌于30℃培养2~3d,霉菌于30℃培养3~5d ; 用稀释水样*平板的菌落计数方法进行计数,报告*总数/(CFU·ml-1) ;挑取典型菌落接种于相应平板,培养条件同上,培养纯化。
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