斐林试剂
斐林试剂(Fehlingssoltion)是一种可以鉴别还原性物质的试剂,一般由*氧化钠与*酸铜溶液配成,由德国化学家赫尔曼·冯·斐林在1849年发明的。斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在,可与还原性糖反应生成砖红色沉淀。
斐林试剂为·二价铜离子的酒石酸钾钠配合物,可以被脂肪醛或还原性糖还原为氧*铜。斐林试剂为深蓝色溶液,是由质量浓度为0.1g/mL的*氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的*酸铜溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的C(OH)2沉淀,在与脂肪醛或还原性糖共热时,蓝色消失,析出红色的氧*铜沉淀。在氧*铜析出过程中,反应液的颜色可能经过由蓝色→绿色→黄色→红色沉淀的逐渐变化,反应较快时,直接观察到红色沉淀。
斐林试剂由*酸铜溶液(甲液)和碱性酒石酸钾钠溶液(乙液)混合而成。平时甲、乙液分别贮存,测定时将甲、乙液等体积混合。两种溶液相混时,生成呈溶解状态的酒石酸钾钠铜络合物。此络合物的溶液具有与普通铜盐不同的鲜明的天蓝色。当它与有还原性的物质共热时,二价的铜即被还原生成一价的氧*铜红色沉淀,由形成的氧*铜量可推算出糖的含量。
斐林试剂必须现配现用的原因是NaOH溶液与CSO4溶液混合会产生
C(OH)2而使C2+沉淀,影响实验的正常使用。在斐林试剂中常添加酒石酸钾钠作为螯合剂,与C2+络合以防止C2+沉淀,所以高中生物学教材中强调要使用现配的斐林试剂,而且NaOH要过量。还原糖与斐林试剂反应很慢,需要加热,为防止试管中过量的NaOH溶液沸腾溅出,造成意外伤害,故50-65℃水浴加热,溶液的颜色由蓝色最终变成砖红色。
综上所述,斐林试剂使用的原理是利用C2+在碱性条件下具有弱的氧化性,与可溶性还原糖反应,生成砖红色的氧*铜。值得注意的是,斐林试剂本身并非无色(而是蓝色的),必须现配现用,先混合再使用,且需50-65℃水浴加热。
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